تولید زایلاناز با بازده بالا توسط سویه تازه جداسازی شده باسیلوس سرئوس با استفاده از کشت مخلوط تغذیه شده و بسترهای ضایعات کشاورزی-صنعتی

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان
1 گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم و فناوری‌ها، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم پزشکی تهران، تهران، ایران
2 گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم و فناوری‌های نوین، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم پزشکی تهران، تهران، ایران
چکیده
زیلانازها آنزیم‌هایی با اهمیت صنعتی هستند، اما تولید آن‌ها می‌تواند چالش‌برانگیز باشد. هدف این مطالعه، جداسازی یک باکتری بومی تولیدکننده زیلاناز و بهبود تولید آنزیم از طریق راهکارهای مختلف کشت بود. برای جداسازی و غربالگری باکتری، نمونه‌های خاک از منطقه لویزان تهران (ایران) جمع‌آوری شدند. سویه منتخب بر اساس آزمون‌های بیوشیمیایی و توالی‌یابی 16S rRNA، به عنوان *Bacillus cereus* شناسایی شد. تولید آنزیم در شرایط کشت ناپیوسته (Batch)، کشت ناپیوسته تغذیه‌شونده (Fed-batch) با افزودن گلوکز، و محیط‌های حاوی سوبستراهای سبوس کشاورزی-صنعتی ارزیابی گردید. در تخمیر ناپیوسته، سویه جداشده *B. cereus* پس از ۲۴ ساعت، حداکثر فعالیت زیلانازی معادل ۱۵۵/۴ واحد بین‌المللی در میلی‌لیتر (IU/mL) نشان داد. در آزمایش تغذیه با گلوکز، افزودن یک‌باره گلوکز تا غلظت نهایی ۲ درصد (وزنی/حجمی) پس از ۶ ساعت، فعالیت آنزیم را به ۲۳۰/۹ IU/mL افزایش داد که تقریباً ۱/۵ برابر بیشتر از نمونه شاهد (کشت ناپیوسته) بود. این آزمایش در حجم کشت ۵۰ میلی‌لیتر و در ارلن‌های ۲۵۰ میلی‌لیتری، در دمای ۳۷ درجه سانتی‌گراد و سرعت چرخش ۱۶۰ دور در دقیقه انجام شد و تمامی آزمایش‌ها به صورت سه‌تکراری صورت گرفتند. در طول این آزمایش‌های ارلنی، pH کنترل نشد. در مقایسه‌ای جداگانه میان کشت ناپیوسته و ناپیوسته تغذیه‌شونده با استفاده از زیلان خالص، فعالیت در کشت ناپیوسته تغذیه‌شونده پس از ۲۴ ساعت به ۲۲۲/۰ IU/mL رسید. در میان سوبستراهای کشاورزی-صنعتی آزمایش‌شده، سبوس جو مؤثرترین گزینه بود و پس از ۲۴ ساعت فعالیت ۱۳۳/۲ IU/mL را ایجاد کرد؛ این در حالی است که فعالیت حاصل از زیلان خالص ۱۵۵/۴ IU/mL بود. این نتایج نشان می‌دهند که سویه منتخب قادر به تولید زیلاناز در شرایط آزمایشگاهی (مقیاس ارلن) است و افزودن گلوکز و استفاده از سبوس جو می‌توانند متغیرهای فرآیندی مفیدی برای بهینه‌سازی‌های بیشتر باشند.

چکیده تصویری

تولید زایلاناز با بازده بالا توسط سویه تازه جداسازی شده باسیلوس سرئوس با استفاده از کشت مخلوط تغذیه شده و بسترهای ضایعات کشاورزی-صنعتی
کلیدواژه‌ها